La Iglesia Mayor Parroquial de Nuestra Señora de la O de Rota, en la provincia de Cádiz, Andalucía, España, es un templo católico levantado en el siglo XVI en estilo gótico-renacentista y cuyo mobiliario es mayormente de época barroca.
La Iglesia está formada por una nave central de estilo gótico tardío con claras tendencias platerescas y renancentistas, y de cinco capillas añadidas.

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